ELISA試劑盒運(yùn)用水浴或在將反應(yīng)溶液參與至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地掃除“邊緣效應(yīng)"，并且可進(jìn)步測(cè)定的重復(fù)性。 
呈現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。
咱們?cè)谶\(yùn)用ELISA試劑盒96孔板的實(shí)驗(yàn)測(cè)定的時(shí)分，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，也便是外周孔顯色較基地孔深。
經(jīng)研討證實(shí)在溫育中的熱力學(xué)梯度或許是根本原因之所。
有時(shí)分一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，往往便是上述加樣及試劑的差錯(cuò)所形成的。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)ELISA測(cè)定中，將板從室溫（通常在25℃擺布）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與基地孔之間或許存在一熱力學(xué)梯度。
還有便是在實(shí)驗(yàn)中，必然有運(yùn)用微量加樣器參與樣本的過(guò)程。
太快的話無(wú)法確保微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易致使非特異吸附。濺起會(huì)對(duì)鄰近孔發(fā)作污染。
運(yùn)用時(shí)一定要根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需求收購(gòu)獲取試劑盒，假設(shè)不是試劑盒，或許能提出RNA，但不能確保其質(zhì)量以及完整性。
ELISA試劑盒提示留心：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺起和發(fā)作氣泡。