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ELISA試劑盒的載體和容器
更新時(shí)間:2017-01-16   點(diǎn)擊次數(shù):1311次

ELISA試劑盒小珠通常為直徑0.6cm的圓球,表面經(jīng)磨砂處理后吸附面積大添加。
聚苯乙烯為塑料,可制成各種方式,在測(cè)定進(jìn)程中,它作為載體和容器,不參與化學(xué)反響,加之它的報(bào)價(jià),所以被廣泛選用。
zui常用的載體為微量反響板,于ELISA測(cè)定的商品也稱為ELISA板,用的規(guī)范板形是8×12的96孔式。
為便于作少數(shù)標(biāo)本的查看,有制成8聯(lián)或l2聯(lián)孔條的,放入座架后,巨細(xì)與規(guī)范ELISA板一樣。
聚苯乙烯載體的形狀首要有三種:小試管、小珠和微量反響板。小試管的特征是還能兼作反響的容器,zui終放入分光光度計(jì)中比色。
作為ELISA固相載體,聚氯乙烯板的特征為質(zhì)軟板薄,可切開(kāi),價(jià)廉、但光潔度不如聚苯乙烯板。
ELISA板的特征是能夠一同進(jìn)行很多標(biāo)本的查看,并可在特定的比色計(jì)上靈敏讀出作用。
如今已有多種自動(dòng)化儀器用于微量反響板型的ELISA查看,包含加樣、洗刷、保溫、比色等進(jìn)程,對(duì)操作的規(guī)范化極為有利。
出色的ELISA板應(yīng)該是吸附功用好,空白值低,孔底透明度高,各板之間和同一板各孔之間功用附近。
ELISA試劑盒免疫酶技能的首要試劑為固相的抗原或抗體、酶符號(hào)的抗原或抗體和與符號(hào)酶直接有關(guān)的酶反響底物。
可作固相載體的物質(zhì)很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的功用,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后保存正本的免疫活性。
因而每一批號(hào)的聚苯乙烯制品在運(yùn)用前須查看其功用。
常用的查看辦法為:以必定濃度的人IgG(通常為10ng/ml)包被ELISA板各孔后,每孔內(nèi)參與恰當(dāng)稀釋的酶標(biāo)抗人IgG抗體,保溫后洗刷,加底物顯色,間斷酶反響后別離測(cè)每孔溶液的吸光度。
控制反響條件,使各讀數(shù)在0.8擺布。計(jì)算悉數(shù)讀數(shù)的均勻值。
悉數(shù)單個(gè)讀數(shù)與均勻讀數(shù)之差應(yīng)小于10%.與聚苯乙烯類似的塑料為聚氯乙烯。
在哪一種載體上陽(yáng)性作用與陰性作用差異zui大,這種載體便是這一ELISA測(cè)定的zui合適的固相載體。
聚氯乙烯對(duì)蛋白質(zhì)的吸附功用比聚苯乙烯高,但空白值有時(shí)也略高。
為比照不一樣固相在某一ELISA測(cè)定中的好壞,可用以下辦法加以查驗(yàn):用別的免疫學(xué)測(cè)定辦法選出一個(gè)典型的陽(yáng)性標(biāo)本和一個(gè)典型的陰性標(biāo)本。
ELISA試劑盒將它們別離進(jìn)行一系列稀釋后,在不一樣的固相載體上按預(yù)訂的ELISA操作進(jìn)程進(jìn)行測(cè)定,然后比照測(cè)定作用。

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