技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 正確的下降ELISA試劑盒的高布景
正確的下降ELISA試劑盒的高布景
更新時間:2018-01-22   點擊次數(shù):864次

ELISA試劑盒實驗的原理好像很簡樸,不過乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗刷和關(guān)閉。假定您的布景過高,懷疑關(guān)閉不充分,那么您可以檢驗運用更高濃度的關(guān)閉液,或恰當(dāng)延伸關(guān)閉時間。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有用阻撓許多不同類型的分子相互作用。另一個挑選是運用蛋白和非離子型去污劑這兩種關(guān)閉液,ELISA試劑盒后者可幫助洗刷過程中的關(guān)閉。處理這個題目的一種方法是運用雞或魚的正常血清。好的關(guān)閉液應(yīng)下降非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測試劑發(fā)生相互作用。在實驗結(jié)束時,咱們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于成果的信噪比。

假定您的ELISA試劑盒不幸地碰到了高布景,那么也無需太擔(dān)憂,依次檢查ELISA體系中的組分,并掃除可能存在的標題。記住,非特異的抗體結(jié)合會添加布景。不過,它的缺點在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。為了避免這一點,切勿運用過多的一抗或二抗。

ELISA試劑盒假定布景過高,而您懷疑洗刷不行時,可以檢驗添加洗刷次數(shù)。這種關(guān)閉液廉價、不亂,在去除洗刷過程中的一些非特異結(jié)合上很有用。假定濃渡過高,ELISA試劑盒或許未準確稀釋,則會導(dǎo)致高布景。常用的蛋白關(guān)閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。關(guān)閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占有微孔板中埋伏的結(jié)合位點。
請勿運用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會下降特異結(jié)合,發(fā)生假陰性。這就下降了可發(fā)生信號的抗體非特異結(jié)合的機遇。ELISA試劑盒現(xiàn)在主要有兩種類型的關(guān)閉液:蛋白和非離子型去污劑。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。假定您一向被布景標題所困擾,那么或許您該花些時間來優(yōu)化關(guān)閉液。
 
 

上海晶抗生物工程有限公司

上海晶抗生物工程有限公司

地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室

版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號:滬ICP備16026504號-5  總訪問量:532450  站點地圖  技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng)  管理登陸