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怎么調(diào)整人ELISA試劑盒試驗的對策
更新時間:2020-02-25   點擊次數(shù):892次

ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的使用,但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測作用影響較大,人ELISA試劑盒如不留意,有或許導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。 

    
一.下面將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題解決辦法總結(jié)于下:
     
1.挑選試劑: 挑選質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑,嚴(yán)厲按照試劑說明書進行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
    
2.標(biāo)本收集與保存: 防止使用肉眼可見的溶血標(biāo)本、高脂標(biāo)本和混濁標(biāo)本;2-8℃下,標(biāo)本可放置24-48小時,長時間保存需放置-20℃下。請防止重復(fù)凍融。

二.人ELISA試劑盒具體請參照: 
     
1.試劑使用中的預(yù)備工作及留意事項
 
2.試劑盒中會有提示,一般需要預(yù)備的有: 洗滌液;用前制造;有的試劑盒會標(biāo)明,配好的4度下一般可以放一個月;假如沒有標(biāo)明,盡量用新鮮的,不要多制造。顯色液(有A液和B液的),用前15分鐘制造
 
3. 規(guī)范品:有的試劑盒中規(guī)范品是現(xiàn)已制造好的,4度保存;有的是要現(xiàn)制造的;按照說明書操作,濃縮生物素結(jié)合的二抗和HRP:假如需要制造,試劑盒沒注明配好可以保存多久的話,盡量現(xiàn)配現(xiàn)用(用前15分鐘制造) 
     
4.原則是:試劑盒上沒有指出制造物的貯藏方法的話,應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用;不要怕麻煩;還有小瓶的管子開蓋前要離心,以免蓋子上粘連今后總量不行
    
5.加 樣:室溫溫育的試劑,特別是溫育時間比較短的試驗操作的試劑,加樣對數(shù)據(jù)的影響比較大,特別要留意加樣問題 
 
三.欠好的操作原因:

1.不會正確使用加樣器
    
2.血清或血漿標(biāo)本分離欠好即進行加樣
     
3.人ELISA試劑盒手工操作中,加樣板過多形成加樣後放入孵箱前等待時間過長(特別是室內(nèi)溫度較高時)
    
4.加完標(biāo)本再加酶試劑時酶濺起孔外

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