技術(shù)文章您現(xiàn)在的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 課堂詳解:抗血清制備須注意的問題
課堂詳解:抗血清制備須注意的問題
更新時間:2020-05-20   點(diǎn)擊次數(shù):1011次

抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清,一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。

一種抗原能否引起抗體生成反應(yīng),一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇(Antigenic determinant),另一方面取決于機(jī)體的免疫狀態(tài),當(dāng)具備以上兩個條件后,抗體生成將遵循抗體生成的一般規(guī)律——初次反應(yīng)和再次反應(yīng)。

抗原的種類繁多,包括天然的蛋白質(zhì)抗原和細(xì)胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等,不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般*抗原免疫動物需加用佐劑,尤其在使用可溶性抗原時,以期得到價的抗血清;合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質(zhì)需先通過人工的方法與蛋白質(zhì)載體連接后再與佐劑混合免疫動物,方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機(jī)體內(nèi)存留的時間,從而改變了抗原原有的免疫原性。

其注意事項(xiàng)有如下幾點(diǎn): 

1、動物的免疫反應(yīng)存在著個體差異,甚至有人報告不同品種動物一次免疫后產(chǎn)生的抗體的差別可高達(dá)500倍,所以制備抗血清時不能只免疫一只動物,一般免疫3~4只,因?yàn)橛械膭游锟赡墚a(chǎn)生抗體效價很低或不產(chǎn)生抗體,免疫反應(yīng)好的動物所能提供的抗體往往高于一般動物3~4倍。

2、制成的抗原乳劑是否為油包水乳劑應(yīng)進(jìn)行檢查,否則會影響免疫效果,如不是油包水乳劑,應(yīng)重新制備。

3、要制備價的抗體,必須要加佐劑(一般采用*福氏佐劑),加佐劑后免疫動物,抗體效價至少可增加5倍。但也應(yīng)考慮到,如果抗原中有微量的雜蛋白存在,即使0.005mg,亦可因有佐劑而產(chǎn)生非特異性的抗體,所以要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要和抗原的純度適當(dāng)?shù)厥褂米魟?/p>

4、分裝保存的抗血清應(yīng)注明抗血清的名稱,效價,制備日期以及包裝量。

5、當(dāng)抗原量過少不易提純時,可采用抗原抗體在瓊脂擴(kuò)散中形成的沉淀線直接免疫動物制備抗體。

6、抗血清效價一般以抗血清稀釋倍數(shù)表示。血清效價的檢測方法很多,靈敏度各不同,因此在表示抗血清效價時,應(yīng)標(biāo)明檢測方法。另外,在沉淀反應(yīng)中,出現(xiàn)沉淀時的抗原、抗體比例有一較大的范圍,如用不同濃度的抗原測定效價時,結(jié)果會因此有別,所以在測定抗血清效價時,需注意抗原的濃度。

7、為制備單價特異性高的抗血清,所用抗原純度越高越好,因此,在純化抗原過程中應(yīng)盡量除去可能存在的雜蛋白,這樣可以省去許多時間來吸收抗血清中的非特異性抗體。 

我們公司始終與全國各大醫(yī)院院校、*醫(yī)院、研究所,科研機(jī)構(gòu)等單位的一致認(rèn)可,并宣告了多篇文獻(xiàn),長期以來與很多貨物運(yùn)輸代理公司有著杰出的合作關(guān)系,成就了我們高起點(diǎn)、高素質(zhì)、高標(biāo)準(zhǔn)、高效率、高質(zhì)量的一站式生命科學(xué)解決方案供貨商。若有問題可來詳詢訂購我司產(chǎn)品哦!                        

 

上海晶抗生物工程有限公司

上海晶抗生物工程有限公司

地址:上海市金山工業(yè)區(qū)亭衛(wèi)公路6558號9幢2441室

版權(quán)所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號:滬ICP備16026504號-5  總訪問量:532201  站點(diǎn)地圖  技術(shù)支持:智慧城市網(wǎng)  管理登陸