要問科研怕遇到的糟心事，非買到科研試劑莫屬了，用試劑無非導(dǎo)致兩種結(jié)果：實(shí)驗(yàn)失敗or被動學(xué)術(shù)造假。ELISA試劑盒門檻較低，制假相對簡單，常有不法商家打著種屬全、指標(biāo)全、現(xiàn)貨供應(yīng)的旗號來生產(chǎn)、銷售ELISA試劑盒，曾有老師吐槽“每個月都能收到好幾個從未聽過的廠商向我展示ELISA試劑盒"。針對ELISA試劑盒真假問題，我們整理了一些辨別經(jīng)驗(yàn)（購買前and購買后），希望對大家有所幫助！

購 買 前：

1．選擇正規(guī)公司

國產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè)，比如晶抗生物。將“廠家名"、“ELISA試劑等關(guān)鍵詞在網(wǎng)上搜索，有的網(wǎng)站或論壇如丁香園等會有打假曝光平臺。正規(guī)廠商的ELISA試劑盒通常有技術(shù)發(fā)明支撐和ISO9001國際質(zhì)量體系認(rèn)證，且廠家會定期收集整理試劑盒的文獻(xiàn)引用情況，購買前可向廠家索要相關(guān)材料加以核實(shí)。

2．試劑盒性能參數(shù)

向廠家索要或從其下載產(chǎn)品說明書和質(zhì)控報告，查找ELISA試劑盒的關(guān)鍵質(zhì)控性能參數(shù)：準(zhǔn)確度(加標(biāo)回收率、稀釋線性)、精密度(板內(nèi)差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準(zhǔn)。如果無法提供這些性能參數(shù)數(shù)據(jù)，則說明試劑盒開發(fā)過程不夠科學(xué)嚴(yán)謹(jǐn)，并未做試劑盒性能測試從而無法得到準(zhǔn)確真實(shí)的結(jié)果，也有極大可能是假貨試劑盒。

3. 不常見指標(biāo)的選擇

如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等)，可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或ELISA試劑盒供應(yīng)商。其實(shí)，“貨比三家"有時會有一些“驚喜"，也許你會發(fā)現(xiàn)：某個公司的說明書除了指標(biāo)名稱不一致，其他內(nèi)容基本一樣；某個指標(biāo)，幾家公司試劑盒的性能參數(shù)一樣…一定要記?。宏P(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標(biāo)ELISA試劑盒的公司，那真的是再謹(jǐn)慎也不為過。

4. 所有指標(biāo)常備現(xiàn)貨

抗體并不十分穩(wěn)定，針對非熱門研究指標(biāo)，廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會長期備現(xiàn)貨，若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發(fā)貨，那需謹(jǐn)慎考慮是否要選擇該供應(yīng)商。

購 買 后：

1．檢查

檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量，通常偽劣產(chǎn)品為了降低成本，印刷的質(zhì)量會比較差。其次仔細(xì)閱讀說明書，如上所示查找ELISA的性能指標(biāo)。

2．實(shí)驗(yàn)

① 利用干擾實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原

a. 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液；

b. 37℃孵育15分鐘后，代替原試劑盒中的檢測抗體；

c. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物；

d. 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配，試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原，該試劑盒為假貨ELISA試劑盒；

e. 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性，則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾，影響了其實(shí)際試劑盒抗體的檢測作用，則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。

② 如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B，利用交叉實(shí)驗(yàn)即可鑒別ELISA試劑盒是否造假

a. 取出購買的試劑盒A的包被板兩條；

b. 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；

c. 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線；

d. 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行，加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物；

e. 實(shí)驗(yàn)完畢后，檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線，如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B，無則反之。

f. 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo)，試劑盒A只能檢測A，不能檢測B，即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。