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2014帶您一起選購Z適合的ELISA試劑盒
更新時間:2014-09-23   點擊次數(shù):1470次

在ELISA實驗中因為ELISA試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點,受到了廣大師生朋友的厚愛。現(xiàn)在市面上的既有國產(chǎn)也有進(jìn)口,數(shù)量繁多令人目不暇接,而且質(zhì)量也是參差不齊,不過現(xiàn)在沒關(guān)系了,因為由我們帶您一起,選購那個您的ELISA試劑盒。
1、實驗類型
雖然有多種類型,不過它們都有一個共同特點,就是進(jìn)行抗原捕獲。一般捕獲形式包括將抗原吸附到微孔板或者用微孔板上的抗體進(jìn)行捕獲。In-cell ELISA和酶聯(lián)免疫斑點ELISPOT是兩種特殊的類型,In-cell ELISA需要將微孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞進(jìn)行固定和通透化,然后再用抗體原位檢測。ELISPOT有點像蛋白印跡Western blot,先在帶膜的微孔板中培養(yǎng)細(xì)胞,然后在膜上檢測細(xì)胞分泌的抗原形成斑點。此外,我們還需要根據(jù)自身需要選擇96孔板或是384孔板進(jìn)行ELISA實驗。
2. 抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA試劑盒,實際上有時候二者結(jié)合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進(jìn)行捕獲而單抗進(jìn)行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
3. 交叉反應(yīng)
如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個因素。盡管現(xiàn)在購買源自動物的抗體越來越容易,我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應(yīng)。如果檢測用二抗與捕獲抗體結(jié)合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。
4. 檢測方式
如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進(jìn)行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物(如3,3-二氨基聯(lián)苯胺DAB)。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進(jìn)行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上,也可以結(jié)合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標(biāo)記的酶與親和素標(biāo)記的一抗結(jié)合。此外ELISA的結(jié)果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學(xué)發(fā)光或顯色法檢測等。
如果您對考慮購買的ELISA試劑盒還有任何疑問和顧慮,都可以直接向我們咨詢,我們可以提供免費代測的服務(wù)。

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