我們?cè)谶\(yùn)用ELISA試劑盒96孔板的實(shí)驗(yàn)測(cè)定的時(shí)分，常發(fā)現(xiàn)有“邊緣效應(yīng)"，也即是外周孔顯色較基地孔深。經(jīng)研討證真實(shí)溫育中的熱力學(xué)梯度或許是根本原因之所。聚苯乙烯本身為不良熱導(dǎo)體，在實(shí)驗(yàn)室的慣例ELISA測(cè)定中，將板從室溫（一般在25℃擺布）置于37℃溫箱，板也升溫時(shí)，在外周孔與基地孔之間或許存在一熱力學(xué)梯度。因此運(yùn)用水浴或在將反應(yīng)溶液參與至板孔中時(shí)，將板和溶液均加熱至溫育溫度（如37℃），就可以很容易地掃除“邊緣效應(yīng)"，而且可進(jìn)步測(cè)定的重復(fù)性。 
ELISA試劑盒即是在實(shí)驗(yàn)中，一定有運(yùn)用微量加樣器參與樣本的過(guò)程。提示留心：加樣不可太快，要避免加在孔壁上部，不可濺起和發(fā)作氣泡,ELISA試劑盒太快的話(huà)無(wú)法確保微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū)，易致使非特異吸附,濺起會(huì)對(duì)鄰近孔發(fā)作污染,呈現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異,所以，有時(shí)分一份標(biāo)本用相同的試劑盒這次測(cè)定為陽(yáng)性，下次測(cè)定為陰性，一般即是上述加樣及試劑的過(guò)錯(cuò)所形成的。