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貓巴爾通體(Bartonella)酶聯(lián)免疫定性
更新時間:2014-09-09   點擊次數(shù):1789次

貓巴爾通體(Bartonella)酶聯(lián)免疫定性實驗原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中貓巴爾通體(Bartonella)表達(dá)。用純化的貓巴爾通體(Bartonella)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中巴爾通體(Bartonella)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的巴爾通體(Bartonella)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中貓巴爾通體(Bartonella)的存在與否。

試劑盒組成 

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1瓶

8

陽性對照

0.5ml×1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

9

陰性對照

0.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標(biāo)本要求 

1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

貓巴爾通體(Bartonella)酶聯(lián)免疫定性操作步驟

編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)

 

 

加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。 
溫育:操作同3。
洗滌:操作同5。
顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn))。
測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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E-(Hu)(05)-02985 人白介素18(IL-18)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-18 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02986 人白介素17(IL-17)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-17 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02987 人白介素16(IL-16)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02988 人白介素15(IL-15)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-15 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
E-(Hu)(05)-02989 人白介素13(IL-13)ELISA檢測試劑盒 ,貓巴爾通體(Bartonella)酶聯(lián)免疫定性英文名: IL-13 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T
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E-(Hu)(05)-02991 人白介素12(IL-12/P40)ELISA檢測試劑盒 ,英文名: IL-12/P40 ELISA Kit ,規(guī)格: 48T/96T

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