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SP6 RNA聚合酶

更新時(shí)間:2022-05-03

簡(jiǎn)要描述:

SP6 RNA聚合酶由晶抗生物提供,包括SP6 RNA聚合酶說(shuō)明書(shū),以及SP6 RNA聚合酶級(jí)別,用途等詳細(xì)介紹。

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SP6 RNA聚合酶


其他中文名稱 : SP6核糖核酸聚合酶


英文名稱 : SP6 RNA Polymerase


級(jí) 別 : BR


分子量 : 單體約98kDa


保 存 : -20℃


來(lái) 源 : 大腸桿菌細(xì)胞,含有編碼相應(yīng)RNA聚合酶的克隆基因


濃 度 : 20u/ul(≥100U/ul,HC)


活力定義 : 是指在37℃、60分鐘內(nèi)將1nmol AMP合成摻入到寡聚核苷酸片段(DE-81)光吸收形式)所需的酶量


酶活性分析混合物 : 40mM Tris-HCL(PH8.0), 10mM DTT, 6mM MgCL2, 2mM 亞精胺,0.5mM 各種NTP, 0.6MBq/ML(3H).-ATP和20ug/ml含有相應(yīng)啟動(dòng)子序列的質(zhì)粒DNA


保存緩沖 : 每種聚合酶保存于50mM Tris-HCL(PH8.0), 5mM DTT, 0.1mg/ml BSA,150mM NaC1, 0.5mM ELUGENT去污劑和50%(V/V) 甘油


5×轉(zhuǎn)錄緩沖液 : 200mM Tris-HCL(PH9.0,25℃), 30mM MgCL2, 50mM DTT, 50mM NaC1和10mM 亞精胺


抑制劑 : 金屬螯合劑,當(dāng)NaC1或KC1濃度高于150mM(SP6和T7 RNA聚合酶)時(shí),酶活性降低超過(guò)50%,硫酸銨可使酶活性降低超過(guò)50%


失 活 : 加入EDTA或者70℃加熱10分鐘


質(zhì)量控制 : 相關(guān)測(cè)試表明無(wú)內(nèi)切或外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染


功能測(cè)試 : 體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)


特 點(diǎn) : 合成摻入特殊核苷酸,如氨基-、生物-素-、熒光素-、地高xin-標(biāo)記的核苷酸


性 狀 : 液體,SP6核糖核酸聚合酶是一種依賴DNA的聚合酶,對(duì)SP6啟動(dòng)子序列表現(xiàn)高度專一性。用該酶合成RNA,僅能以SP6 DNA或克隆在SP6 啟動(dòng)下游的DNA作為合成模板。該酶能以32P,35S及3H標(biāo)記的核苷三磷酸為底物


用 途 : 生化研究。合成標(biāo)記和未標(biāo)記的RNA,用于雜交、體外RNA翻譯;作為RNA、siRNA、RNase酶切保護(hù)分析的底物以及基因組DNA測(cè)序的模板;研究RNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)和RNA-蛋白質(zhì)相互作用、RNA剪接;標(biāo)記的RNA探針合成,用于印跡實(shí)驗(yàn)、原位雜交、microarray雜交


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