更新時間:2022-04-27
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中文名:sICAM-1 elisa試劑盒
規(guī) 格:48t/96t
保 存:2~8℃
有效期:6個月
樣 本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特 點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便。
用 途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
操作步驟:
產(chǎn)品僅用于科研實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔加待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加辣根過氧化物酶標記抗小鼠IgG工作液
100μl(取1μl生物-素標記抗體加99μl生物-素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見孔內(nèi)有明顯藍色,即可終止)。
5. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn))。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
6. 用酶標儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
注意事項:
1. 此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
2. 使用前應將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時內(nèi)進行實驗,標本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標本-20℃保存,避免反復凍融。
6. 在反復清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精que度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應注意輕微搖動微孔反應條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標示。
標本中抗體量越多,結合在固相上的酶標抗體愈少,顏色越淺,顏色的深淺和樣品中的sICAM-1含量呈負相關,采用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度(OD 值),根據(jù)標準曲線,計算測試樣品中sICAM-1濃度。
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