更新時間:2021-11-24
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傳代方法:細胞*匯合時,倒掉舊液,加入消化液(0.25%胰蛋白酶+0.03%EDTA)2ml消化,顯微鏡下觀察細胞*脫離瓶壁分離成單個細胞后棄掉胰酶,加培養(yǎng)基混勻分瓶,T25瓶中加培養(yǎng)基至6-8ml,T75瓶加培養(yǎng)基至20ml,37℃,5%CO2孵箱培養(yǎng)。
培養(yǎng)是生物學和醫(yī)學研究zui常用的手段之一,可分為原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)兩種。原代培養(yǎng)是直接從生物體獲取細胞進行培養(yǎng)。由于細胞剛剛從活體組織分離出來,故更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài)。這一方法可為研究生物體細胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段,同時也為以后傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件。
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物品、用品消毒滅菌:
細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在無菌試驗陰性后才能使用,操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。
細胞污染的種類:
細胞污染一般可分為微生物污染和真核生物污染,其中微生物污染包括真菌和酵母、細菌、支原體等,而真核生物一般是細胞系間的交叉污染。
交叉養(yǎng)需要注意:
一、時間上分隔開來,每天細胞培養(yǎng)先操作,其它細菌之類操作靠后,且操作后消毒酒精臺面消毒,紫外照射1小時。
二、其它操作要小心,避免帶入污染,當然,如果有必要加抗生素,還是盡早加,比細胞污染了再去搶救要來得好。
收貨須知:
收貨當天發(fā)現(xiàn)異常,請在24小時內(nèi)及時聯(lián)系客服,逾期視為收貨良好;凍存管形式,收貨后及時置于-80℃冰箱保存,若長時間不使用,應過夜轉(zhuǎn)移至液氮保藏;T25 形式,收貨后先培養(yǎng)瓶原裝置于培養(yǎng)箱靜養(yǎng)4h,然后再對細胞進行常規(guī)操作;復蘇時每管一次用完不得留存,復蘇后傳一代,即可正常使用;請嚴格按照本說明操作,否則造成細胞失活等情形,不予提供補發(fā)服務。
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