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人熱休克蛋白90HSP-90ELISA試劑盒

更新時(shí)間:2021-11-17

簡(jiǎn)要描述:

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<strong><strong><strong>人熱休克蛋白90HSP-90ELISA試劑盒</strong></strong></strong>


人熱休克蛋白90HSP-90ELISA試劑盒經(jīng)過(guò)數(shù)年的努力已迅速成為集科研和生產(chǎn)為一體的專業(yè)化生物工程公司,公司將進(jìn)一步加強(qiáng)人才經(jīng)營(yíng)、產(chǎn)品經(jīng)營(yíng),不斷提升企業(yè)的核心竟?fàn)幜?,?shí)現(xiàn)具有高科技產(chǎn)業(yè)體系、知識(shí)化創(chuàng)業(yè)團(tuán)隊(duì)的國(guó)際化的公司,服務(wù)于生命科學(xué)領(lǐng)域,迎接世界經(jīng)濟(jì)一體化所帶來(lái)的機(jī)遇與挑戰(zhàn)。


ELISA試劑盒的操作詳情:

1. 使用前,將所有試劑充分混勻,不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。

2. 根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔,每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。

3. 加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體,蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鐘。

4. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作4次,如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

5. 每孔加入100ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。

6. 甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,重復(fù)此操作4次,如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。

7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鐘,避免光照。

8. 取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。

9. 在933nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。


該試劑盒組成包括:96孔酶標(biāo)板、酶標(biāo)二抗、四環(huán)素抗體工作液、四環(huán)素6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液,底物顯色液、終止液、濃縮洗滌液、濃縮復(fù)溶液、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品溶液、蓋板膜、自封袋、說(shuō)明書(shū)和質(zhì)檢報(bào)告,上海晶抗生物科技有限公司歡迎新老客戶前來(lái)訂購(gòu)。


人熱休克蛋白90HSP-90ELISA試劑盒

雙抗體夾心法:

1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml,在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)液,次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘,(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。

2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí),然后洗滌,(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。

3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml,37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。

4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。

5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。

6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+"、“-"號(hào)表示;也可測(cè)OD值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。


<strong><strong><strong>人熱休克蛋白90HSP-90ELISA試劑盒</strong></strong></strong>

◇ 洗滌方法:

1. 自動(dòng)洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒,洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干,洗板5次。


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